جداسازی اجزاء پروتئینی آرتمیا اورمیانا و بررسی اثرات ممانعت ازپیری این عوامل در سلولهای فیبروبلاست انسانی در محیط کشت سلولی

تغییر در ساختار پروتئین در طول پیری مسئول دگرگونی مرفولوژی و تغییر ساختار پوست به صورت ایجاد چروک، از دست دادن خاصیت ارتجاعی و خشکی می شود.استرس ، اشعه ماورای بنفش یکی از عواملی که بر کلاژن ، الاستین و ملانوسیت اثر گذاشته و باعث ایجاد چروک ، لکه هایی بر روی پوست و خشکی آن می شود. تحقیق در مورد عوامل ممانعت کننده از پیری سلولی گزینه جالب توجهی برای استفاده در صنایع بهداشتی آرایشی در بیوتکنولوژی است. آرتمیا خرچنگ دریایی متعلق به آب های شوربوده و بیشترین توانایی تحمل استرس را در بین موجودات چند سلولی دارا است. آرتمیا به شرایط سخت آب مانند کاهش فشار اکسیژن و دماهای بالا مقاوم است. ناپلوئی (آرتمیای تازه از تخم در آمده) به علت خصوصیات تغذیه ای مواد غذایی مناسبی برای محیط های آبی فراهم آورده و هم چنین در ایران به طور سنتی موارد مصرف دارویی دارد. مشخص شده که عصاره این جاندار حاوی دی گوانوزید تترا فسفات می باشد که جاندار از آن به عنوان منبع تولید انرژی استفاده می کند . این ترکیب یک ماده بیولوژیک فعال است که سبب تحریک متابولیسم سلولهای پوستی و افزایش تکثیر سلولهای اپیدرم می گردد. از آنجائیکه آرتمیا اورمیانا گونه غالب موجود در دریاچه ارومیه است و بررسی اولیه نشان می دهد که تاکنون مطالعه ای در زمینه اثرات ضد پیری آرتمیا بر روی سلولهای پوست انجام نگرفته است و با توجه به مصرف روز افزون عصاره آرتمیا در لوازم بهداشتی آرایشی بخصوص محصولات ضد پیری سلولی و جوان کننده پوست، بررسی عوامل مولکولی موجود در عصاره آرتمیا اورمیانا بومی ایران بر روی سلولهای فیبروبلاست در سطح آزمایشگاه ضروری به نظر می رسد. سلولهای فیبروبلاست سلولهای چسبنده ای هستند که در محیط کشت dmem با ?? ? fbs رشد می کنند. در این تحقیق آرتمیا در دمای c ?28و8 ph= در آب دریای مصنوعی درحال بهم خوردن برای مدت ?? ساعت انکوبه و hatch گردید. عصاره گیری از ناپلوئی ها با روش سونیکاسیون انجام و عصاره آرتمیا استخراج شد. خالص سازی عصاره خام آرتمیا با ستون کروماتوگرافی تعویض یونی با رزین de52 سفارز انجام گردید. سپس سلولهای فیبروبلاست با رقت های متفاوتی از اجزا بدست آمده از کروماتوگرافی و عصاره خام آرتمیا تیمار گردیدند. تست های انجام شده نشان داد که به ترتیب اجزاء 5و7و6 بدست آمده از ستون کروماتوگرافی اثر افزایشی بر روی رشد(تستmttو brdu)، اثر افزایشی بر روی سنتز کلاژن (تست rt-pcr)و ضد پیری(x-gal) داشته به طوری که جزء 5 جدا شده از ستون بیشترین افزایش سپس اجزاء7و6 بیشترین اثر و دیگر اجزاء(2و3و4) اثر کاهشی بر روی رشد داشته اند